发布单位：武汉纽斯特生物技术有限公司 发布时间：2022-6-8
灵敏度
通过比较10个b0孔平均光密度值(od)和10个5号管标准品的平均光密度值，计算出灵敏度。camp浓度的检测---通过标准曲线上0位置的两个标准偏差来测定。
od(b0平均数) =0.685± 0.003
od（5号 标准品平均数）=0.604± 0.010
光密度偏差(0-0.4 pmol/ml) =0.081
2 sds of the zero standard =0.006
灵敏度 =081.0006.0/0.8×0.4 pmol/ml =29.6 fmol/ml
因此为筛选出腺苷酸环化酶的激l活剂或磷酸二酯酶的抑制l剂，需要一个高敏感度、特---的、可重复的方案用于检测c---的含量。考虑到大分子的化合物可能存在较弱的影响，这一个初筛是有---的。
目前商业化提供的一些c---检测试剂盒主要使用的是非亲和纯化的c---多克l隆抗l体。尽管据称有特---，但这些多克l隆抗c---抗l体与camp和gtp呈现一定程度的交叉反应。且在大多数细胞类型中，c---含量低于camp 100倍。
elisa试剂盒回收率是反应待测物在样品分析过程中的损失的程度，损失越少，回收率越高，如果作标液1ppm，就是1毫克/升，而作出标准数据为0.99毫克/升，就是说你的回收率是99%，这个与真实成分有密切的关系，说明方法的准确度。比如水中总无机氯含量测定，样品水中含有无机氯20mg/l，取100ml被测水样品，加入0.1ml浓度为10mg/ml的含无机氯标准样品，测定时忽略体积变化，如果测定出样品中无机氯为2.98mg/l，则认为回收率为99%。
武汉纽斯特生物科技有限公司（wuhanneweastbiotechonologyco.ltd），系美国生命科学试剂供应商美国neweastbio在的子公司。公司位于武汉东湖---开发区光谷生物城.美国neweastbio---于生命科学和生物技术领域，主要产品有小分子、elisa试剂盒、蛋白等，与高校和研究所、大制药公司、生物科技公司和医院等客户建立了长期稳定的合作关系，产品销往。
体外用gtpγs/gdp处理蛋白以用作阳性和阴性的对照
注意：在细胞体内环境条件下大约有10%的ras被激l活，而在体外用gtpγs处理大约有90%的ras被激l活。
1.
准备两个离心管，每个管中各加入0.5 ml的细胞提取物（如果是纯的ras蛋白则每个管中加入的蛋白量为1ug）。
2.
每个管中加入20ul 0.5m edta(终浓度即为20 mm)。
3.
一个管中加入5ul的100x gtpγs（终浓度即为100 um）作为阳性对照。另一个管中加入5ul的100x gdp（终浓度即为1 mm）作为阴性对照。
4.
将离心管置于30°c条件下反应30 min并不断搅动。
5.
终止反应：将管置于冰上并加入32.5ul 1m mgcl2(终浓度即为60mm)。
