注意步骤

1. 在使用前，将所有试剂放置30分钟，平衡至室温。

2. 用试剂预先润洗头在使用；取各种样品、标准品和试剂必需更换头。

3. 移取标准品和样品到微孔底部。

4. 从微孔的边缘加入试剂，以避免污染。

5. 本试剂盒使用可拆分的微孔酶标条，使用者可根据样品量多少进行拆分。未使用的酶标条保持干燥，密封于试剂盒提供的铝封袋中，于4℃保存。微孔酶标条需安装在相应的框架上使用。

6. 在加入显色底物前，---微孔内没有残留的洗涤液。微量残留的洗涤液可能导致分析结果的变化。

因此为筛选出腺苷酸环化酶的激l活剂或磷酸二酯酶的抑制l剂，需要一个高敏感度、特---的、可重复的方案用于检测c---的含量。考虑到大分子的化合物可能存在较弱的影响，这一个初筛是有---的。

目前商业化提供的一些c---检测试剂盒主要使用的是非亲和纯化的c---多克l隆抗l体。尽管据称有特---，但这些多克l隆抗c---抗l体与camp和gtp呈现一定程度的交叉反应。且在大多数细胞类型中，c---含量低于camp 100倍。

elisa检测试剂盒应用定性夹心免l疫检测技术，用合成的hev多肽抗原包被微孔板板条，这些多肽是型hev------酸序列中抗原性很强的肽段，分别来自于该---的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或标准品加入孔中并孵育，如果其中存在hev igm抗l体，这些抗l体就会与hev 的多肽抗原结合，并固定在上面，洗板除去其它非特---抗l体和样品中的其它成份。然后加入羊抗人igm-hrp（辣根---化物酶）酶结合物，经第二次孵育后，酶结合物就会与头一次孵育结合上的hev igm抗l体相结合，洗板除去未结合的酶结合物，加入tmb底物溶液，在第三次孵育时会发生酶-底物反应，只有那些含有hev igm抗l体和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化，加入---溶液终止酶和底物间的反应，并在波长: 450nm处测量o.d.值,按照本hev igm抗l体elisa试剂盒的测试标准, o.d.值大于或等于cut-off值的样品被认为是初试阳性。

ras活性分析。纯化的ras蛋白分别用gdp (lane 1)和gtpγs (lane 2)进行活化。然后用特---识别ras活性构象的鼠单克l隆抗l体(cat. # 26909)孵育。活性ras珠子颗粒用特---识别ras活性构象的兔多克l隆抗l体(cat # 21021)进行免l疫印迹实验。图展示的是ras-gdp和ras-gtpγs的western blot实验结果。