发布单位:武汉纽斯特生物技术有限公司 发布时间:2022-8-20
纽斯特生物的elisa试剂盒适用于检测经过---处理而终止内源性磷酸二酯酶活性的camp样品。这种样品可直接应用于检测,而不需要蒸发和进一步的处理。
组织样本需预先冰冻于液氮中。在不锈钢研钵中用液氮将组子样本研磨成精细粉末。待液氮挥发完后,称量冰冻组织样本并加入10倍体积的0.1m hcl混匀。室温以大于600g离心力离心,取上层清夜用0.1m hcl稀释至适当浓度。
对于生长的组织培养液中的细胞,首先移除培养基,然后加入0.1m hcl处理细胞。孵育10分钟并观察细胞是否被裂解;如果裂解不充分,接着孵育10分钟并观察。以大于600g离心力于室温离心,收集上清直接用于实验。临用前在0.1m hcl中加入0.1%至1%浓度的triton-x 100可增强细胞和组织裂解。在这个浓度范围内,去污剂并不干扰试验的结合部位,但是会适度的增加光密度值。含有triton的样品需利用标准曲线估计浓度,为了较精l确的测定,标准曲线需以相同方式稀释。取1 ml细胞培养上清加入10μl浓---,600g离心力于室温离心,上清液直接用于实验测定分析。