试剂盒组成材料和试剂
1. 羊抗小鼠igg包被的96孔微孔板一张 catalog no.30101
该微孔板将特---识别小鼠igg 的山羊抗l体包被于可拆分酶标条上。
2. camp偶联的辣根---化物酶工作液6 ml catalog no. 30102
本包装含1000×偶联酶储存液和稀释缓冲液。
3. 抗camp的小鼠单克l隆抗l体工作液6 ml catalog no. 26002-2
本包装含1000×抗l体储存液和稀释缓冲液。
注意：为了稳定和长效的实验，抗l体储存于-80℃。在使用前将6μl 1000×偶联酶储存液加入到6 ml 稀释缓冲液中配制为工作液，并轻轻混匀。工作液请避免反复冻融。
4. 中和液6 ml catalog no. 30103
5. 10×浓缩洗涤液15 ml catalog no. 30103
含去污剂的磷酸盐缓冲液。
6. camp标准品0.25 ml catalog no. 30203
浓度5000 pmol/ ml
7. 显色底物a，12 ml catalog no. 30107
8. 显色底物b， 12 ml。 catalog no. 30108
9. 终止液，6 ml； catalog no. 30110
注意：该溶液有腐蚀性；储存时请旋紧瓶盖
对于生长的组织培养液中的细胞，首先移除培养基，然后加入0.1m hcl处理细胞。孵育10分钟并观察细胞是否被裂解；如果裂解不充分，接着孵育10分钟并观察。以大于600g离心力于室温离心，收集上清直接用于实验。临用前在0.1m hcl中加入0.1%至1%浓度的triton-x 100可增强细胞和组织裂解。在这个浓度范围内，去污剂并不干扰试验的结合部位，但是会适度的增加光密度值。含有triton的样品需利用标准曲线估计浓度，为了较精l确的测定，标准曲线需以相同方式稀释。取1 ml细胞培养上清加入10μl浓---，c--- assaykit，600g离心力于室温离心，上清液直接用于实验测定分析。
camp浓度为16.0pmol/ml的样品，用0.1m hcl进行连续七次1:2梯度稀释。将实际的camp浓度和测定的camp浓度绘制图表。该直线的斜率为1.000，相关系数为0.999。
交叉反应
部分相关化合物的交叉反应由竞争elisa测定。将可能的交叉反应物溶解到试剂盒分析缓冲液中，浓度从500pmol/ml至500，000pmol/ml。这些样品通过---化在camp竞争分析中被测定，通过比较样品中交叉试剂的实际浓度，可以计算出交叉反应，并用百分比(%)表示。
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