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包被抗l体(或抗原)的选择:将抗l体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求ph在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的较适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的od值。选择od值较大而蛋白量较少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
注意步骤
1. 在使用前,将所有试剂放置30分钟,c--- kit,平衡至室温。
2. 用试剂预先润洗枪头在使用;取各种样品、标准品和试剂必需更换枪头。
3. 移取标准品和样品到微孔底部。
4. 从微孔的边缘加入试剂,以避免污染。
5. 本试剂盒使用可拆分的微孔酶标条,使用者可根据样品量多少进行拆分。未使用的酶标条保持干燥,密封于试剂盒提供的铝封袋中,于4℃保存。微孔酶标条需安装在相应的框架上使用。
6. 在加入显色底物前,---微孔内没有残留的洗涤液。微量残留的洗涤液可能导致分析结果的变化。
免l疫测定技术的基础在于抗原抗l体之间的特异结合反应,所以任何好的诊断l试剂离不开好的原料,如抗原抗l体,酶等。以前用于免l疫测定的抗原通常为各种纯化抗原,而抗l体则为纯化抗原免l疫动物后获得的多克l隆抗l体和使用杂交瘤技术得到的单克l隆抗l体,而抗原或抗l体的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。近年来,随着分子生物学的发展,使用基因工程方法制备各种特殊的抗原或抗l体及其酶结合物等免l疫测定试剂几成为现实的新一代试剂,各种新型使用的测定方法也不断出现。
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