使用前将各种试剂取出放置30分钟,平衡至室温。所有标准品和样品必需设置平行对照实验。
快速加入试剂至样品中,camp elisakit,立即漩涡震荡2秒混匀。
1. 依据实验键盘纸决定酶标条的使用量,将剩余的酶标条连同干燥剂一起放回密封塑料袋,密封,4℃保存。
2. 移取50μl中和液至各个微孔中,除了ta(全活性)孔和blank(空白)孔。
3. 移取100μl 0.1m hcl至nsb(非特异结合)孔和b0孔(0 pmol/ml camp标准品)。
4. 移取100μl camp标准品至相应的孔。
5. 移取100μl样品至相应的孔。
6. 移取50μl 0.1m hcl至nsb(非特异结合)孔。7. 移取50μl 偶联酶至各孔中,除了ta(全活性)孔和blank(空白)孔。
8. 移取50μl 抗l体工作液至各孔中,除了ta(全活性)孔、blank(空白)孔和nsb(非特异结合)孔。
9. 将酶标孔置于孔板振动器上,250~500rpm,室温孵育2小时。
10. 在吸水纸上拍干微孔内溶液,加洗涤液400μl每孔洗3次,每次需拍干。
11. 后一次洗涤,清空各微孔,在干净的无尘吸水纸上轻巧酶标板数次,以---没有洗涤液残留。
12. 加5μl 偶联酶至ta(全活性)孔。
13. 每孔200μl显色底物溶液,于室温静置5~30分钟。(显色底物a和b需在临用前15分钟内等体积混合,并避光放置。)
14. 每孔加入50μl终止液。终止后立即读数。
15. 清除酶标l仪blank(空白)孔值,读取450nm处的光密度值,在570nm至590nm之间有修正。如果酶标l仪不能自动清除blank(空白)孔值,那么手动扣除每个读数的blank(空白)孔光密度值。
纽斯特生物开发出了鼠单克l隆抗l体的camp elisa 检测试剂盒。该单克l隆抗l体对camp的特---比camp、atp等类似的小分子高出108 倍以上。相较于其他的多克l隆抗l体camp试剂盒,纽斯特生物camp elisa试剂盒能---的提高其灵敏性和特---,且能有效避免来自动物多克l隆抗l体的批次间差异, 因此可以提供长久有效地可重复性定量检测。
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