c--- elisakit-纽斯特生物技术公司

武汉纽斯特生物科技有限公司（wuhanneweastbiotechonologyco.ltd），系美国生命科学试剂供应商美国neweastbio在的子公司。公司位于武汉东湖---开发区光谷生物城.美国neweastbio---于生命科学和生物技术领域，c--- elisakit，主要产品有小分子、elisa试剂盒、蛋白等，与高校和研究所、大制药公司、生物科技公司和医院等客户建立了长期稳定的合作关系，产品销往全球。

体外用gtpγs/gdp处理蛋白以用作阳性和阴性的对照

注意：在细胞体内环境条件下大约有10%的ras被激l活，而在体外用gtpγs处理大约有90%的ras被激l活。

1.        

准备两个离心管，每个管中各加入0.5 ml的细胞提取物（如果是纯的ras蛋白则每个管中加入的蛋白量为1ug）。

2.        

每个管中加入20ul 0.5m edta(终浓度即为20 mm)。

3.        

一个管中加入5ul的100x gtpγs（终浓度即为100 um）作为阳性对照。另一个管中加入5ul的100x gdp（终浓度即为1 mm）作为阴性对照。

4.        

将离心管置于30°c条件下反应30 min并不断搅动。

5.        

终止反应：将管置于冰上并加入32.5ul 1m mgcl2(终浓度即为60mm)。

因此为筛选出腺苷酸环化酶的激l活剂或磷酸二酯酶的抑制l剂，需要一个高敏感度、特---的、可重复的方案用于检测c---的含量。考虑到大分子的化合物可能存在较弱的影响，这一个初筛是有---的。

目前商业化提供的一些c---检测试剂盒主要使用的是非亲和纯化的c---多克l隆抗l体。尽管据称有特---，但这些多克l隆抗c---抗l体与camp和gtp呈现一定程度的交叉反应。且在大多数细胞类型中，c---含量低于camp 100倍。