c--- elisakit-纽斯特

武汉纽斯特生物科技有限公司（wuhanneweastbiotechonologyco.ltd），系美国生命科学试剂供应商美国neweastbio在的子公司。公司位于武汉东湖---开发区光谷生物城.美国neweastbio---于生命科学和生物技术领域，主要产品有小分子、elisa试剂盒、蛋白等，与高校和研究所、大制药公司、生物科技公司和医院等客户建立了长期稳定的合作关系，产品销往全球。

体外用gtpγs/gdp处理蛋白以用作阳性和阴性的对照

注意：在细胞体内环境条件下大约有10%的ras被激l活，而在体外用gtpγs处理大约有90%的ras被激l活。

1.        

准备两个离心管，每个管中各加入0.5 ml的细胞提取物（如果是纯的ras蛋白则每个管中加入的蛋白量为1ug）。

2.        

每个管中加入20ul 0.5m edta(终浓度即为20 mm)。

3.        

一个管中加入5ul的100x gtpγs（终浓度即为100 um）作为阳性对照。另一个管中加入5ul的100x gdp（终浓度即为1 mm）作为阴性对照。

4.        

将离心管置于30°c条件下反应30 min并不断搅动。

5.        

终止反应：将管置于冰上并加入32.5ul 1m mgcl2(终浓度即为60mm)。

试剂盒组成材料和试剂

1. 羊抗小鼠igg包被的96孔微孔板一张 catalog no.30101

该微孔板将特---识别小鼠igg 的山羊抗l体包被于可拆分酶标条上。

2. camp偶联的辣根---化物酶工作液6 ml catalog no. 30102

本包装含1000×偶联酶储存液和稀释缓冲液。

3. 抗camp的小鼠单克l隆抗l体工作液6 ml catalog no. 26002-2

本包装含1000×抗l体储存液和稀释缓冲液。

注意：为了稳定和长效的实验，抗l体储存于-80℃。在使用前将6μl 1000×偶联酶储存液加入到6 ml 稀释缓冲液中配制为工作液，并轻轻混匀。工作液请避免反复冻融。

4. 中和液6 ml catalog no. 30103

5. 10×浓缩洗涤液15 ml catalog no. 30103

含去污剂的磷酸盐缓冲液。

6. camp标准品0.25 ml catalog no. 30203

浓度5000 pmol/ ml

7. 显色底物a，12 ml catalog no. 30107

8. 显色底物b， 12 ml。 catalog no. 30108

9. 终止液，6 ml； catalog no. 30110

注意：该溶液有腐蚀性；储存时请旋紧瓶盖