camp elisakit-纽斯特

武汉纽斯特生物科技有限公司（wuhanneweastbiotechonologyco.ltd），系美国生命科学试剂供应商美国neweastbio在的子公司。公司位于武汉东湖---开发区光谷生物城.美国neweastbio---于生命科学和生物技术领域，主要产品有小分子、elisa试剂盒、蛋白等，与高校和研究所、大制药公司、生物科技公司和医院等客户建立了长期稳定的合作关系，产品销往全球。

体外用gtpγs/gdp处理蛋白以用作阳性和阴性的对照

注意：在细胞体内环境条件下大约有10%的ras被激l活，而在体外用gtpγs处理大约有90%的ras被激l活。

1.        

准备两个离心管，每个管中各加入0.5 ml的细胞提取物（如果是纯的ras蛋白则每个管中加入的蛋白量为1ug）。

2.        

每个管中加入20ul 0.5m edta(终浓度即为20 mm)。

3.        

一个管中加入5ul的100x gtpγs（终浓度即为100 um）作为阳性对照。另一个管中加入5ul的100x gdp（终浓度即为1 mm）作为阴性对照。

4.        

将离心管置于30°c条件下反应30 min并不断搅动。

5.        

终止反应：将管置于冰上并加入32.5ul 1m mgcl2(终浓度即为60mm)。

洗液不够时，可用蒸馏水自行配制ph7.4，0.02m的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的---钠后可长期保存。

底物是光敏感的，要在临用前现配。

检测前，要打开酶l标仪，使之稳定10分钟以上。

底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。

待检样品要澄清，否则会影响结果。

温浴时间应遵守试剂盒规定。

应尽量做双孔实验，这样才能---数据的准确性。

对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。