试剂盒组成材料和试剂
1. 羊抗小鼠igg包被的96孔微孔板一张 catalog no.30101
该微孔板将特---识别小鼠igg 的山羊抗l体包被于可拆分酶标条上。
2. camp偶联的辣根---化物酶工作液6 ml catalog no. 30102
本包装含1000×偶联酶储存液和稀释缓冲液。
3. 抗camp的小鼠单克l隆抗l体工作液6 ml catalog no. 26002-2
本包装含1000×抗l体储存液和稀释缓冲液。
注意：为了稳定和长效的实验，抗l体储存于-80℃。在使用前将6μl 1000×偶联酶储存液加入到6 ml 稀释缓冲液中配制为工作液，并轻轻混匀。工作液请避免反复冻融。
4. 中和液6 ml catalog no. 30103
5. 10×浓缩洗涤液15 ml catalog no. 30103
含去污剂的磷酸盐缓冲液。
6. camp标准品0.25 ml catalog no. 30203
浓度5000 pmol/ ml
7. 显色底物a，12 ml catalog no. 30107
8. 显色底物b， 12 ml。 catalog no. 30108
9. 终止液，camp elisakit，6 ml； catalog no. 30110
注意：该溶液有腐蚀性；储存时请旋紧瓶盖
武汉纽斯特生物科技有限公司（wuhanneweastbiotechonologyco.ltd），系美国生命科学试剂供应商美国neweastbio在的子公司。公司位于武汉东湖---开发区光谷生物城.美国neweastbio---于生命科学和生物技术领域，主要产品有小分子、elisa试剂盒、蛋白等，与高校和研究所、大制药公司、生物科技公司和医院等客户建立了长期稳定的合作关系，产品销往全球。
体外用gtpγs/gdp处理蛋白以用作阳性和阴性的对照
注意：在细胞体内环境条件下大约有10%的ras被激l活，而在体外用gtpγs处理大约有90%的ras被激l活。
1.
准备两个离心管，每个管中各加入0.5 ml的细胞提取物（如果是纯的ras蛋白则每个管中加入的蛋白量为1ug）。
2.
每个管中加入20ul 0.5m edta(终浓度即为20 mm)。
3.
一个管中加入5ul的100x gtpγs（终浓度即为100 um）作为阳性对照。另一个管中加入5ul的100x gdp（终浓度即为1 mm）作为阴性对照。
4.
将离心管置于30°c条件下反应30 min并不断搅动。
5.
终止反应：将管置于冰上并加入32.5ul 1m mgcl2(终浓度即为60mm)。
灵敏度
通过比较10个b0孔平均光密度值(od)和10个5号管标准品的平均光密度值，计算出灵敏度。camp浓度的检测---通过标准曲线上0位置的两个标准偏差来测定。
od(b0平均数) =0.685± 0.003
od（5号 标准品平均数）=0.604± 0.010
光密度偏差(0-0.4 pmol/ml) =0.081
2 sds of the zero standard =0.006
灵敏度 =081.0006.0/0.8×0.4 pmol/ml =29.6 fmol/ml
camp elisakit-纽斯特由武汉纽斯特生物技术有限公司提供。武汉纽斯特生物技术有限公司为客户提供“g蛋白活性,camp和c--- elisa试剂盒,蛋白点突变”等业务，公司拥有“纽斯特”等品牌，---于生物化工等行业。欢迎来电垂询，联系人：乐经理。
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