重组人arf1 蛋白-纽斯特生物技术_武汉生物化工

武汉纽斯特生物技术有限公司提供重组人arf1 蛋白-纽斯特生物技术。

分析原理

neweast biosciences arl1激l活检测试剂盒基于配置特---抗arl1-gtp从细胞提取物或体外检测活性arl1-gtp水平的单克l隆抗l体gtpγs负载arl1活化分析。简而言之，抗活性arl1小鼠单克l隆抗l体将用含有arl1-gtp的细胞裂解液培养。然后，绑定的活动arl1将被下拉蛋白质a/g琼脂糖。用抗arl1兔多克l隆抗l体或抗arl1小鼠单克l隆抗l体进行免l疫印迹分析，检测沉淀的活性arl1。

需要但未提供的材料

1---性和非---性细胞裂解物

2蛋白酶抑制素

4°c摇管器或振动筛

40.5 m edta，ph8.0

51百万氯---

62x还原sds-page样品缓冲液

7电泳和免l疫印迹系统

8免l疫印迹洗涤缓冲液，如tbst（10 mm tris hcl，重组人arf1 蛋白，ph 7.4，0.15 m nacl，0.05%

吐温-20）

9免l疫印迹阻断缓冲液（含5%脱脂奶粉或3%牛血l清白蛋白的tbst）

10pvdf或硝化纤维膜

11次级抗l体

12ecl检测试剂

arl1激l活试验。纯化的gst标记的arl1蛋白用抗活性arl1单克l隆抗l体（cat。#26924）用gdp（车道1）或gtpγs（车道2）处理后，用抗arl1单克l隆抗l体（cat）进行印迹。#26056年）。显示arl1蛋白输入控制在底部面板中。

产品描述

arf样蛋白1（arl1）是调节性gtpase家族中的一员，位于ras中gtpases的超家族，在真核生物中具有高度保守的同源基因。arl1---用于果蝇和秀丽隐杆线虫的早期胚胎发育。arl1在一级序列，细胞位置和功能（膜交通的调节）到arf1–6甚至共享几个共同的有约束力的合作伙伴。除了在膜交通中的作用高尔基/跨高尔基网络，有---表明arl1可能在离子稳态中起作用酵母。

目前还没有直接测定arl1-gtpase活性的方法。neweast biosciences arl1激l活检测试剂盒是基于特定构型的单克l隆抗l体特---识别arl1 gtp，但不识别arl1 gdp的抗l体。鉴于单克l隆抗l体对其抗原，活化试验可在短时间内进行。这个分析结果---，重现性一致。

阳性对照和阴性对照的体外gtpγs/ gdp蛋白质上样量

注意：体内细胞---将激l活可用arf 6的大约10％，而体外gtpγs蛋白负载将激l活arf 6的将近90％。

1，将0.5 ml每种细胞提取物等分到两个微量离心管中（或使用1 μg纯化的arf 6蛋白）。

2，向每个试管中加入20 μl 0.5 m edta（终浓度为20 mm）。

3，将5 μl 100 xgtpγs（至100 μm，终浓度）加到一个试管中（阳性对照）。

4，在第二个试管中加入5 μl 100 x gdp（至1 mm，终浓度）（阴性对照）。

5，在搅拌下将试管在30°c孵育30分钟。

6，通过将试管放在冰上并添加32.5 μl 1 m mgcl2（至60 mm，终浓度）来停止加载。

重组人arf1 蛋白-纽斯特生物技术(图)由武汉纽斯特生物技术有限公司提供。武汉纽斯特生物技术有限公司是湖北武汉 ,生物化工的企业，多年来，公司贯彻执行科学管理、---发展、诚实守信的方针，满足客户需求。在武汉纽斯特---携全体员工热情欢迎---垂询洽谈，共创武汉纽斯特美好的未来。

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