camp assaykit-武汉纽斯特(商家)

结果计算

样品中camp浓度有多种计算方法。x轴表示camp标准品浓度，y轴表示净光密度的平均值或者百分比值。

1 样品和标准品的净光密度(od)平均值的计算：

净od平均值 = od平均值 － nsb孔od平均值

2 计算不同梯度浓度标准品的结合率占较大结合率(b0孔)的百分比，camp assaykit，计算公式 如下：

百分比值 = (净od平均值/ b0孔od平均值)×100

3 绘制净od平均值或百分比值对camp标准品浓度的logit-log曲线。通过插值即可得到样品中camp浓度。

试剂准备

1. 非---化camp标准品

将5000 pmol/ml camp标准品溶液平衡至室温。从#1至#6标记六只洁净试管。移取475μl 0.1m hcl到#1号试管，400μl到#2至#6号试管。加入25μl 5000 pmol/ml camp标准品到#1管中，剧烈涡旋震荡。从#1管中取出100μl溶液至#2管中，涡旋震荡。以此类推，重复上步操作，梯度稀释至#6管。

经以上操作，#1至#6管中camp标准品浓度分别为250，50，10，2，0.4和0.08 pmol/ml（详见camp实验稀释详情键盘纸）。稀释过的标准品需在30分钟内使用。

标记一只试管作为无标准品空白对照（nsb）。移取600μl 0.1m hcl到nsb管中。

2. 洗涤液

将15 ml 10×洗涤液储液加到135 ml去离子水中，稀释成工作液。稀释液可在室温保存至试剂盒有效期限，或者3个月。