武汉纽斯特生物科技有限公司(wuhanneweastbiotechonologyco.ltd),系美国生命科学试剂供应商美国neweastbio在的子公司。公司位于武汉东湖---开发区光谷生物城.美国neweastbio---于生命科学和生物技术领域,主要产品有小分子、elisa试剂盒、蛋白等,与高校和研究所、大制药公司、生物科技公司和医院等客户建立了长期稳定的合作关系,人环磷酸腺苷 c--- elisa,产品销往。
典型数据
由于标准曲线的od值可能会根据
目的:试验人员应为每项试验拟合标准曲线。典型
特---
该方法灵敏度高,特---好,可用于人ltbr的检测。不
使用前将各种试剂取出放置30分钟,平衡至室温。所有标准品和样品必需设置平行对照实验。
快速加入试剂至样品中,立即漩涡震荡2秒混匀。
1. 依据实验键盘纸决定酶标条的使用量,将剩余的酶标条连同干燥剂一起放回密封塑料袋,密封,4℃保存。
2. 移取50μl中和液至各个微孔中,除了ta(全活性)孔和blank(空白)孔。
3. 移取100μl 0.1m hcl至nsb(非特异结合)孔和b0孔(0 pmol/ml camp标准品)。
4. 移取100μl camp标准品至相应的孔。
5. 移取100μl样品至相应的孔。
6. 移取50μl 0.1m hcl至nsb(非特异结合)孔。7. 移取50μl 偶联酶至各孔中,除了ta(全活性)孔和blank(空白)孔。
8. 移取50μl 抗l体工作液至各孔中,除了ta(全活性)孔、blank(空白)孔和nsb(非特异结合)孔。
9. 将酶标孔置于孔板振动器上,250~500rpm,室温孵育2小时。
10. 在吸水纸上拍干微孔内溶液,加洗涤液400μl每孔洗3次,每次需拍干。
11. 后一次洗涤,清空各微孔,在干净的无尘吸水纸上轻巧酶标板数次,以---没有洗涤液残留。
12. 加5μl 偶联酶至ta(全活性)孔。
13. 每孔200μl显色底物溶液,于室温静置5~30分钟。(显色底物a和b需在临用前15分钟内等体积混合,并避光放置。)
14. 每孔加入50μl终止液。终止后立即读数。
15. 清除酶标l仪blank(空白)孔值,读取450nm处的光密度值,在570nm至590nm之间有修正。如果酶标l仪不能自动清除blank(空白)孔值,那么手动扣除每个读数的blank(空白)孔光密度值。
本试剂盒利用竞争酶联免l疫分析方法来测定细胞提取物或体外腺苷酸环化酶实验中的camp的水平。简而言之,将羊抗鼠多克l隆抗l体包被在酶标板上,细胞提取物或体外腺苷酸环化酶实验中的camp与固定数量的偶联辣根---化物酶的camp或碱性磷酸酶竞争性的结合抗camp单克l隆抗l体,已知的camp作为标准品来做标准曲线。经过一段时间孵育,洗掉所有试剂,加入底物进行显色。将多孔板置于酶标l仪上,于450nm或405nm波长下,进行读数。黄色的光强度与样品中camp的浓度呈反比关系。基于camp标准品所得曲线,通过测得的光密度可以计算出样品中camp的浓度。
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