武汉纽斯特-camp elisakit

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    2022-8-26

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1、要---移液的准确性,误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但有人员进行矫正。

2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排各一支。吸取不同的液体后,要更换头。即使是吸取标准品时。

3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。

4、实验时,要使底物避光保存。

5、用吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。

6、吸取液体时,要用量程和需要量接近的去吸,减少误差。







因此为筛选出腺苷酸环化酶的激l活剂或磷酸二酯酶的抑制l剂,需要一个高敏感度、特---的、可重复的方案用于检测c---的含量。考虑到大分子的化合物可能存在较弱的影响,这一个初筛是有---的。

目前商业化提供的一些c---检测试剂盒主要使用的是非亲和纯化的c---多克l隆抗l体。尽管据称有特---,但这些多克l隆抗c---抗l体与camp和gtp呈现一定程度的交叉反应。且在大多数细胞类型中,camp elisakit,c---含量低于camp 100倍。






包被抗l体(或抗原)的选择:将抗l体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求ph在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的较适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的od值。选择od值较大而蛋白量较少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
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