ras活性分析。纯化的ras蛋白分别用gdp (lane 1)和gtpγs (lane 2)进行活化。然后用特---识别ras活性构象的鼠单克l隆抗l体(cat. # 26909)孵育。活性ras珠子颗粒用特---识别ras活性构象的兔多克l隆抗l体(cat # 21021)进行免l疫印迹实验。图展示的是ras-gdp和ras-gtpγs的western blot实验结果。
试剂准备
1. 非---化camp标准品
将5000 pmol/ml camp标准品溶液平衡至室温。从#1至#6标记六只洁净试管。移取475μl 0.1m hcl到#1号试管,400μl到#2至#6号试管。加入25μl 5000 pmol/ml camp标准品到#1管中,剧烈涡旋震荡。从#1管中取出100μl溶液至#2管中,涡旋震荡。以此类推,重复上步操作,梯度稀释至#6管。
经以上操作,#1至#6管中camp标准品浓度分别为250,50,10,2,c--- kit,0.4和0.08 pmol/ml(详见camp实验稀释详情键盘纸)。稀释过的标准品需在30分钟内使用。
标记一只试管作为无标准品空白对照(nsb)。移取600μl 0.1m hcl到nsb管中。
2. 洗涤液
将15 ml 10×洗涤液储液加到135 ml去离子水中,稀释成工作液。稀释液可在室温保存至试剂盒有效期限,或者3个月。
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恢复
下面列出的基质中加入一定量的重组人ltbr和
线性 试剂盒的线性度通过加入适当的 精密度 批内精密度(批内精密度):低、中、高三个样品
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