c---kit-纽斯特生物技术公司

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    2020-10-26

黄经理
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camp作为---的第二信使,c---kit,可调节细胞对各种外源和内源信号分子的反应。 它主要通过激l活蛋白激酶、控制特定的离子通道、磷酸二酯酶调节细胞环核苷酸浓度以及激l活epac(通过camp直接激l活蛋白交换)(3-6)来调节生理过程。通过腺苷酸环化酶可以实现atp转化为camp。 哺乳动物体内的主要腺苷酸环化酶家族均是横跨膜的,具有9个亚型,且可通过g蛋白gs或钙离子/钙调素(1)激l活。另外,还有一种可溶性的腺苷酸环化酶,可以通过碳酸盐或ca2 +调节(7)。


对于生长的组织培养液中的细胞,首先移除培养基,然后加入0.1m hcl处理细胞。孵育10分钟并观察细胞是否被裂解;如果裂解不充分,接着孵育10分钟并观察。以大于600g离心力于室温离心,收集上清直接用于实验。临用前在0.1m hcl中加入0.1%至1%浓度的triton-x 100可增强细胞和组织裂解。在这个浓度范围内,去污剂并不干扰试验的结合部位,但是会适度的增加光密度值。含有triton的样品需利用标准曲线估计浓度,为了较精l确的测定,标准曲线需以相同方式稀释。取1 ml细胞培养上清加入10μl浓---,600g离心力于室温离心,上清液直接用于实验测定分析。




环磷酸腺苷 (腺苷-3’,5’-环化一磷酸,camp)能调节各种生理功能,如生物学心l血管功能、 学习和记忆、 嗅觉、 免l疫反应、哮l喘及shen功能(1,2)。camp是磷酸二酯酶---激l活腺苷酸环化酶催化atp环化形成的,激l活或抑制磷酸二酯酶能使camp的浓度提高。激l活受体的腺苷酸环化酶的阻断剂和camp的特定磷酸二酯酶的抑制l剂,广泛用于人类---。
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